Реактивы для молекулярной биологии — неотделимая часть ваших исследований

Реагент RiZol для выделения суммарной РНК из различных биологических образцов — это готовый к использованию реагент для выделения высококачественной суммарной РНК из образцов человеческого, животного, растительного, дрожжевого, бактериального и вирусного происхождения. Под действием реагента RiZol происходит гомогенизация биологического образца и лизис клеток, не нарушая целостность РНК за счет ингибирования действия РНКаз. Процедура выделения РНК занимает не более часа. Выделение ДНК и белков с использованием реагента RiZol — менее трех часов. Выделенная РНК может быть использована для синтеза кДНК, ОT-ПЦР, трансляции in vitro и др.

Особенности реагента RiZol

Реагент RiZol имеет следующие особенности:

• время выделения РНК — 1 час;
• время выделение ДНК — 3 часа;
• полученная РНК может быть использована после выделения для ПЦР; молекулярного клонирования, блоттинга, конструирования библиотек кДНК;
• дополнительная очистка полученной РНК после выделения не требуется.

Условия хранения и перевозки: при 20 °С в темном месте.

Набор FastDNA Spin for Feces быстро и эффективно выделяет геномную ДНК из свежих или замороженных образцов экскрементов человека и животных, а также из почвы, водоемов, сточных вод, ила и др. Рекомендовано использовать с гомогенизатором FastPrep или с альтернативным прибором.

Клетки-хозяева, а также клетки бактерий, грибов, простейших и другие клетки, присутствующие в образцах фекалий легко лизируются в течение 40 секунд.

Разрушение клеток в гомогенизаторе обеспечивается угловым движением адаптера с траекторией в форме «восьмёрки» с одновременной разнонаправленной бомбардировкой образцов лизирующими матрицами, находящимися в пробирках вместе с буферным раствором, что обеспечивает высокую воспроизводимость, превосходящую традиционную методы выделения.

Образцы помещают в 2 мл пробирки, содержащие Лизирующий матрикс E – смесь, содержащую стеклянные (диаметр 4 мм), кварцевые (диаметр 0,1 мм) и керамические (диаметр 1,4 мм) шарики, способные эффективно лизировать экскременты любых организмов.

Образцы предварительно промываются подготовительным буфером.

Гомогенизация проводится в присутствии MT буфера и натриевого фосфатного буфера. Реагенты для предварительно лизиса и лизиса были тщательно разработаны, чтобы защитить от растворения нуклеиновые кислоты при лизисе клеток, облегчают получение геномной ДНК, РНК и сводят к минимуму контаминацию от гуминовых кислот и полифенолов.

По завершении лизиса образцы центрифугируются, в результате чего образуется осадок из разрушенных частиц и матрицы.

Для выделения ДНК из супернатанта используется технология GENECLEAN, применяющая силикагелевые спин-фильтры.

Элюированная ДНК полностью готова к использованию для электрофореза, ПЦР и другим исследованиям.

• Лизирующий матрикс Е в пробирках, 50×2,0 мл;
• спин – колонки, 50 шт;
• пробирк-ловушки для сбора чистой ДНК, 50 шт;
• подготовительный буфер, 25 мл;
• буфер MT, 8 мл;
• натрия фосфатный буфер, 100 мл;
• раствор PPS для осаждения белков, 25 мл;
• связывающий матрикс, 66 мл;
• промывочный буфер №1, 120 мл;
• промывочный буфер №2, 12 мл;
• раствор TES для элюирования, 20 мл;
• краситель BBS для геля, 200 мкл;
• паспорт безопасности MSDS;
• сертификат анализа.

Необходимые материалы, не входящие в комплект (не поставляются): Гомогенизатор FastPrep или альтернативный прибор с высокой скоростью вращения (микроцентрифуга), в который можно свободно устанавливать для вращения 2,0 мл пробирки; микроцентрифужные пробирки (2,0 мл или 1,5 мл); 15 мл стерильные пробирки для связывания ДНК; ротатор, 100% этанол.

Условия хранения и транспортировки: 15 – 30 °C.

Набор для выделения ДНК из клеток, присутствующих в почве или других экологических пробах (экскременты, вода из водоемов, сточные воды, ил) до 300 мг. Рекомендуется использовать с гомогенизатором FastPrep или с альтернативным прибором.

Набор для почвы эффективно менее чем за 30 минут выделяет из почвы геномную ДНК, готовую к использованию в ПЦР.

Растительные и животные ткани, бактерии, водоросли, споры грибов и другие почвенные организмы легко лизируются в течение 40 секунд.

Разрушение клеток в гомогенизаторе обеспечивается угловым движением адаптера с траекторией в форме «восьмёрки» с одновременной разнонаправленной бомбардировкой образцов лизирующими матрицами, находящимися в пробирках вместе с буферным раствором, что обеспечивает высокую воспроизводимость, превосходящую традиционную методы выделения.

До 500 мг почвенной пробы помещают в 2 мл пробирки, содержащие Лизирующую матрицу E – смесь стеклянных (4 мм в диаметре), кварцевых (0,1 мм в диаметре) и керамических (1,4 мм в диаметре) шариков, способных эффективно разрушать все почвенные организмы, включая трудные для лизиса споры эубактерий, эндоспоры, грамположительные бактерии, дрожжи, водоросли, нематоды и грибы.

Гомогенизация происходит в присутствии МТ буфера и буфера фосфата натрия, реагенты для лизиса были тщательно разработаны, чтобы защитить от растворения нуклеиновые кислоты и белки при лизисе клеток. Эти реагенты эффективно работают вместе, облегчая выделение ДНК, максимально снижая контаминацию от РНК. По завершению лизиса образцы центрифугируются, в результате чего образуется осадок из разрушенных частиц почвы, мусора и матрицы. Полученную ДНК очищают, используя технология GENECLEAN , применяющая силикагелевые фильтры SPIN и устраняющая гуминовые кислоты и полифенолы, которые могут препятствовать ПЦР.

Элюированная ДНК полностью готова к использованию для электрофореза, ПЦР и другим исследованиям.

• Лизирующий матрикс Е в пробирках, 50×2,0 мл; спин–колонки, 50 шт;
• пробирки-ловушки для сбора чистой ДНК, 50 шт;
• буфер MT, 8 мл;
• натрия фосфатный буфер, 60 мл;
• раствор PPS для осаждения белков, 25 мл;
• связывающий матрикс, 66 мл;
• концентрированный промывочный раствор, 12 мл;
• раствор для элюции ДНК 20 мл;
• краситель BBS для геля, 200 мкл;
• паспорт безопасности MSDS;
• сертификат анализа.

Необходимые материалы, не входящие в комплект (не поставляются): Гомогенизатор FastPrep или альтернативный прибор с высокой скоростью вращения (микроцентрифуга), в который можно свободно устанавливать для вращения 2,0 мл пробирки; микроцентрифужные пробирки (2,0 мл или 1,5 мл); 15 мл стерильные пробирки для связывания ДНК; ротатор.

Условия хранения и транспортировки: 15–30 °C.

Листовка по экстракции ДНК из андосоля, вулканической почвы здесь

Ингибитор РНКаз RiBond ингибирует рибонуклеазную активность эукариотических ферментов, таких как РНКаза A, РНКаза B, РНКаза C, и защищает РНК от неспецифического гидролиза. Представляет собой рекомбинантный белок массой 50 кДа, экспрессируемый в E.coli, предназначен для использования в приложениях, где присутствие РНКаз может снизить качество результатов экспериментов, например при выделении РНК, синтезе кДНК, ОТ-ПЦР, транскрипции и трансляции in vitro.

Условия хранения: -20 °С.

Реагент RiSave для стабилизации и хранения РНК в образцах крови или костного мозга для последующего анализа предназначен для стабилизации и хранения внутриклеточной мРНК из периферической крови или костного мозга, что актуально в случаях транспортировки, либо при длительном хранении биоматериала для последующего выполнения молекулярно-генетических исследований. Реагент содержит в своем составе вещества, стабилизирующие мРНК, что обеспечивает максимально близкие по отношению к нативному биоматериалу значения экспрессии исследуемых генов.

Особенности реагента RiSave

Реагент RiSave имеет следующие особенности:

• стабилизирует РНК в образцах крови или костного мозга;
• незаменим при анализе экспрессии генов;
• пригоден для длительного хранения образцов без деградации РНК;
• совместим с реагентом RiZol для последующего выделения РНК;
• хранение и использование при комнатной температуре.

Рекомендации по условиям хранения и транспортировки образцов крови и костного мозга с использованием реагента для стабилизации РНК:

• комнатная температура (от 18 до 25 °С) — 3 суток;
• хранение в холодильнике (от 2 до 8 °С) — 5 суток;
• заморозка (от -20 до -70 °С) — до 8 лет.

Условия хранения: 18-25 °C.

Реагент Riti для стабилизации РНК в разнообразных образцах тканей: головного мозга, сердца, почки, селезенки, печени, яичек, скелетной мышцы, жировой ткани, легких и тимуса, быстро проникает в ткань и стабилизирует клеточную РНК при комнатной температуре, одинаково эффективен для выделения различных типов РНК.

Особенности реагента Riti

Реагент Riti имеет следующие особенности:

• позволяет не проводить немедленную заморозку образца в жидком азоте или выделение РНК с последующей обратной транскрипцией;
• стабилизирует РНК в разнообразных образцах тканей;
• быстро проникает в ткань и стабилизирует клеточную РНК при комнатной температуре;
• используется для длительного хранения образцов тканей без деградации РНК.
• совместим с реагентом RiZol, реагентом TRIzol или иными коммерчески доступными наборами для последующего выделения РНК из ткани;
• перед выделением РНК достаточно просто удалить реагент, дополнительная пробоподготовка при этом не требуется;
• при изоляции взвеси клеток желательно ресуспендировать их в небольшом объеме PBS.

Реагент сохраняет РНК в тканях в течение:

• 1 день при 37 °C;
• 1 неделю при 25 °C;
• 1 месяц при 4 °C;
• до 1 года при -20 °C.

Условия хранения: 18-25 °C.

Шприц-пробирки RiTube предназначены для стабилизации и хранения внутриклеточной мРНК из периферической крови или костного мозга, для транспортировки, или длительного хранения биоматериала для последующего выполнения молекулярно-генетических исследований. Реагент содержит в своем составе вещества, стабилизирующие мРНК, что при последующих исследованиях обеспечивает максимально близкие по отношению к значениям экспрессии исследуемых генов в нативном биоматериале.

Шприц-пробирки RiTube с биообразцами следует хранить в вертикальном положении. В случае долгосрочного хранения образцов в холодильнике при температуре 2 – 8 °C или в морозильной камере (-20 °C) требуется предварительная экспозиция при комнатной температуре (но не выше 25 °С) не менее 4 часов. При глубокой заморозке при температуре -80 °C, образцы следует предварительно заморозить при -20 °C в течении 24 часов, после чего можно перенести замороженные образцы на хранение при температуре -80 °C.

Рекомендации по хранению биообразцов периферической крови в шприц-пробирках:

• 4 – 72 часа при 18–25 °C;
• 4 – 120 часов при 2–8 °C;
  
• 4 часов — 6 месяцев при -20 °C.

Условия хранения: 18 – 25 °C.

MMLV–RH – генетически модифицированная обратная транскриптаза (ревертаза) вируса лейкемии мышей (M-MuLV). Она отличается от обратной транскриптазы MMLV дикого типа структурой, каталитическими свойствами и температурным оптимумом активности. Фермент проявляет РНК- и ДНК-зависимую полимеразную активность, но лишен активности РНКазы Н. MMLV–RH проявляет оптимальную активность при +42°С (активна до +50°С). Фермент способен синтезировать первую цепь кДНК длиной до 10 т.н. и включать модифицированные основания.

Кроме обратной транскриптазы, набор содержит два типа буфера на основе KCl и (NH₄)₂SO₄, оптимизированные для проведения эффективной реакции обратной транскрипции с любых матриц РНК, в том числе содержащих участки повышенной сложности (сильно структурированные или GC-богатые).

Олиго(dT)₁₆ праймер и случайный гексапраймер позволяют более узконаправленно подходить к обратной транскрипции интересующих типов или участков РНК. Случайный гексапраймер неспецифически связывается с РНК-матрицей и используется для синтеза кДНК со всех типов РНК в составе суммарной РНК. Олиго(dT)₁₆ праймер селективно отжигается на полиадениновых последовательностях РНК, обеспечивая синтез кДНК только с мРНК, содержащих поли(А)-3’-конец. Также можно использовать специфичные праймеры для синтеза определённой последовательности.

Состав набора

* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль dTMP в кислотонерастворимый продукт за 10 мин при +37 °С.

Транскриптаза обратная Smart RT проявляет максимальную активность при температуре 35-42 °С, катализирует матричный синтез ДНК используя в качестве матрицы РНК, при этом не обладает активностью РНКазы Н и 3' → 5' экзонуклеазной активностью. Для проведения реакции необходимо наличие random-праймера.

Особенности Транскриптазы обратной Smart RT

• Оптимальная температура, °С - 35-42;
• отсутствие активности РНКазы Н;
• отсутствие 3' → 5' экзонуклеазной активности.

Области применения транскриптазы обратной Smart RT

• Синтез кДНК по матрице РНК;
• ОТ-ПЦР;
• мультиплексная ОТ-ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Условия хранения: -20 °С.

Транскриптаза обратная термостабильная Smart RTT проявляет максимальную активность при температуре 55 °С, катализирует матричный синтез ДНК используя в качестве матрицы РНК, при этом не обладает активностью РНКазы Н и 3' → 5' экзонуклеазной активностью. Для проведения реакции необходимо наличие random-праймера

Особенности транскриптазы обратной термостабильной Smart RTT

• Оптимальная температура, °С – 55;
• проведение обратной транскрипции с образцов РНК со сложной вторичной структурой;
• отсутствие активности РНКазы Н;
• отсутствие 3' → 5' экзонуклеазной активности.

Области применения транскриптазы обратной термостабильной Smart RTT

• Обратная транскрипция;
• ОТ-ПЦР;
• мультиплексная ОТ-ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Условия хранения: -20 °С.

Экстра-микс для ОТ-кПЦР Real-RT-PCR (5x) – это готовая к использованию 5-кратная смесь предназначенная для анализа молекул РНК с помощью одностадийной ОТ-ПЦР. Экстра-микс Real-RT-PCR (5x) содержит смесь RTaq ДНК-полимеразы с горячим стартом, термостабильной обратной транскриптазы Smart RTT, dATP, dCTP, dGTP, dTTP и оптимизированного буферного раствора, содержащего MgCl2. Обратная транскриптаза Smart RTT обладает термостабильностью, отсутствием активности РНКазы Н и позволяет работать с РНК имеющей сложную вторичную структуру, синтезируя более протяженную кДНК, увеличивает специфичность и количество получаемой ДНК. Для проведения реакции ОТ-ПЦР в экстра-микс необходимо добавить РНК-матрицу, праймеры и при необходимости флуоресцентно-меченные зонды или интеркалирующий краситель. Оптимально подобранное соотношение ферментов и буферного раствора позволяют проводить мультиплексный анализ в одной пробирке.

Основные характеристики экстра-микса для ОТ-кПЦР Real-RT-PCR (5x)

• Простое и удобное проведение одностадийной ОТ-ПЦР;
• проведение обратной транскрипции по матрице РНК имеющей сложную вторичную структуру;
• пониженный риск контаминации за счет сокращения манипуляций при подготовке реакции;
• возможность проведения мультиплексной реакции в одной пробирке;
• удобство использования при анализе большого количества образцов.

Применение экстра-микса для ОТ-кПЦР Real-RT-PCR (5x)

• Одностадийная ОТ-ПЦР в реальном времени;
• мультиплексная одностадийная ОТ-ПЦР в реальном времени;
• анализ экспрессии генов;
• получение ПЦР-продуктов с возможностью клонирования в Т-вектора.

Комплект поставки экстра-микс для ОТ-кПЦР Real-RT-PCR (5x).

Условия хранения: -20 °С.

• Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 тыс. п.н.
  

ДНК-полимераза RTaq является модифицированной версией термостабильной Taq ДНК-полимеразы обратимо химически инактивированной для реализации технологии «горячего старта», позволяющей при комнатной температуре проводить подготовку реакции амплификации и исключающей образование неспецифических ПЦР-продуктов и димеров-праймеров. Активация фермента происходит в течение первой денатурации, дополнительный нагрев не требуется. RTaq ДНК-полимераза специально разработана для проведения моно- и мультиплексных ПЦР и ОТ-ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Особенности RTaq ДНК-полимеразы

• Повышенная специфичность синтеза ПЦР-продуктов;
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• высокая точность синтеза: в 15 раза выше по сравнению с Taq ДНК-полимеразой;
• умеренная устойчивость к ингибиторам;
• получение ПЦР-продуктов с 3' dA-концами;
• обладает 5' → 3' полимеразной активностью;
• обладает 5' → 3' экзонуклеазной активностью.

• Моно- и мультиплексная ПЦР с детекцией в режиме реального времени;
• ОТ-ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Условия хранения: -20 °С.

ДНК-полимераза Super Fusion – это высокоточная ДНК-полимераза c горячим стартом состоит из ДНК-связывающего домена Sso7d из Saccharolobus solfataricus слитого с Pfu ДНК-полимеразой Pyrococcus furiosus и благодаря этому амплифицирует ПЦР-продукты с очень высокой скоростью и точностью, в 15 раз точнее, чем Taq ДНК полимераза, обладает устойчивостью к ингибиторам и может быть использована для синтеза сложных, GC-богатых и длинных ампликонов длиной до 30 тыс. п.н.

Технологии горячего старта реализованного в полимеразе дает возможность постановки ПЦР-реакции при комнатной температуре и исключает деградацию праймеров и матрицы во время подготовки ПЦР, а также уменьшает вероятность образования неспецифических ПЦР-продуктов.

ДНК-полимераза Super Fusion незаменима для генно-инженерных приложений в которых последовательность ПЦР-продуктов должна полностью соответствовать матрице.

Особенности ДНК-полимеразы Super Fusion

• Высокая точность синтеза: в 15 раза выше по сравнению сTaq ДНК-полимеразой;
• амплифицикация фрагментов длиной до 30 тыс. п.н.;
• амплифицикация сложных и GC-богатых участков ДНК;
• возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре;
• повышенная специфичность синтеза, отсутствие деградации праймеров и матрицы в процессе подготовки ПЦР;
• высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• устойчивость к ингибиторам;
• обладает 5' → 3' полимеразной активностью;
• обладает 3' → 5' экзонуклеазной активностью;
• очищена от плазмидной и геномной ДНК E.coli и подходит для молекулярно-биологических работ с E.coli.

• Высокоточная ПЦР;
• амплификация длинных фрагментов ДНК: до 30 тыс. п.о.;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мультиплексная ПЦР;
• аналих на основе микрочипов.

Условия хранения: -20 °С.

ДНК-полимераза Lamp выделена из штамма E.coli, несущего модифицированный клонированный ген большого фрагмента ДНК-полимеразы I из Bacillus stearothermophilus. Фермент обладает 5’- 3’ сильной вытесняющей активностью, и при этом не обладает 5’-3’ и 3’-5’ экзонуклеазной активностью, что позволяет использовать его для проведения изотермальной амплификации, в том числе петлевой изотермальной амплификации (LAMP – Loop-Mediated Isothermal Amplification).

Температурный оптимум фермента 60-65 °С. Фермент также обладает обратно-транскриптазной активноcтью, что позволяет использовать его для проведения обратной транскрипции и ПЦР (RT-LAMP – Reverse Transcription- Loop-Mediated Isothermal Amplification).

Особенности ДНК-полимеразы Lamp

• Оптимизирована для проведения LAMP – петлевой изотермальной амплификации;
• предназначена для изотермальной амплификации ДНК и РНК, в том числе в реальном времени;
• обладает высокой процессивностью;
• обладает высокой устойчивостью к влиянию ингибиторов.

Области применения

• Изотермальная ПЦР;
• изотермальная ПЦР в реальном времени;
• полногеномное секвенирование.

Комплект поставки ДНК-полимераза Lamp; 10х буфер для проведения реакции; 100 мМ MgCl₂.

Условия хранения: -20 °С.

Этидий бромистый — краситель для визуализации нуклеиновых кислот в акриламидном и агарозном геле. Легко флуоресцирует красновато-коричневым цветом при воздействии ультрафиолета, флуоресценция бромистого этидия увеличивается в 21 раз при связывании с двухцепочечной РНК и в 25 раз при связывании с двухцепочечной ДНК.