Бензонуклеаза — это нуклеаза, расщепляющая все формы как ДНК, так и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые). Фермент эффективен в широком диапазоне рабочих условий. Оптимальное значение pH для активности фермента составляет от 8,0 до 9,2. Бензонуклеаза гидролизует фосфодиэфирные связи, что приводит к образованию олигодезоксинуклеотидов с концевыми 5’-монофосфатами длиной 3-5 оснований.
Применение:
Бензонуклеаза идеальна для широкого спектра применений, где желательно полное расщепление нуклеиновых кислот:
- для гидролиза природных или денатурированных нагреванием ДНК и РНК;
-
для удаления нуклеиновых кислот во время экстракции белка: бензонуклеаза уменьшает вязкость образца и облегчает последующие операции по очистке рекомбинантного белка или экстракции белка из образцов клеток тканей;
-
для удаления нуклеиновой кислоты из клеточного или бактериального лизата, снижения вязкости раствора и увеличения выхода белка;
-
для удаления примесей нуклеиновых кислот из препаратов рекомбинантного белка для подготовки образцов для двумерного гель-электрофореза белков;
-
для предотвращения слипания клеток в клеточной смеси;
-
для расщепление нуклеиновых кислот для облегчения получения высококачественных телец включения перед ренатурацией нерастворимых белков;
-
для удаления загрязнения ДНК при приготовлении проб вакцины и вируса.
Единица активности.
За единицу активности бензонуклеазы принимают количество фермента, превращающего 50 мкг ДНК спермы лосося в нуклеотиды за 30 минут при 37 °C в реакционном буфере: 50 мМ Трис-HСl, pH 8,0 и 1 мМ MgCl₂.
|
CAS No
|
9025-65-4
|
|
Чистота
|
≥ 90% (SDS-PAGE)
|
|
Концентрация
|
250 ед./мкл
|
|
Молекулярный вес (кДа)
|
30 000
|
|
Источник
|
Рекомбинантный белок полученный из E. coli
|
|
Оптимальная реакционная температура
|
20 - 37 °С
|
|
Оптимальный реакционный буфер
|
50 мМ Трис-HСl, 1 мМ MgCl₂, 50 - 150 мМ NaCl, pH 8,0
|
|
Токсичность
|
атоксичный
|
|
Условия хранения
|
50 мМ Трис-HCl, pH 8,0, 50 мМ NaCl, 5 мМ MgCl₂ и 50% глицерин
|
|
Температура хранения
|
-20 °C
|
