Top.Mail.Ru
armenia@dia-m.ru 8 (800) 234-05-08
(+374 94) 010173
Ваш регион Москва?

Эндонуклеазы рестрикции FastDigest — быстрый гидролиз в универсальном буфере. Обзор

04.02.2022

Эндонуклеазы рестрикции FastDigest — это 176 ферментов полностью активных в одном универсальном буфере FastDigest и FastDigest Green, позволяющих проводить гидролиз за 5-15 минут.

Буферы FastDigest Green и FastDigest являются уникальными буферными растворами для гидролиза, обеспечивающие полную активность всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest. Эта система позволяет выполнять двукратный и многократный гидролиз с любой комбинацией ферментов. Нет необходимости в последовательном гидролизе разными эндонуклеазами рестрикции или смене буфера. Обычные эндонуклеазы рестрикции могут иметь неспецифическую («звездную») активность из-за продолжительного времени инкубации, высокой концентрации фермента и (или) глицерина, высоких значений pH или низкой ионной силы. Ферменты FastDigest позволяют избежать этих недостатков и обеспечить проведение однократных или многократных гидролизов за 5 минут без сокращения специфичности.

Буфер FastDigest Green дает возможность прямого нанесения реакционной смеси непосредственно на гель, он содержит реагент плотности и два трекинговых красителя для отслеживания.

Ферменты, участвующие в модификации молекул ДНК/РНК, такие как лигазы, фосфатазы, киназы и ДНК-полимеразы, полностью активны в буферных растворах FastDigest и FastDigest Green. Поэтому, на последующих этапах, ферменты можно сразу добавлять в реакционную смесь FastDigest. Нет необходимости в замене буфера или проведении очистки реакционной смеси.

Когда необходимо варьировать условия реакции гидролиза ДНК/РНК, то в этом случае можно использовать обычные эндонуклеазы рестрикции имеющие широкий выбор реакционных буферов, разные оптимальные температуры гидролиза и инактивации, и различную чувствительность к метилированию.


Рис 1. Буфер FastDigest Green.


Рис.2. Гидролиз плазмидной ДНК эндонуклеазами
рестрикции FastDigest и обычными

Рис.3. Однократный, двукратный и трехкратный гидролиз плазмидной ДНК в буферном растворе

Реакционная смесь, содержащая буфер FastDigest Green Buffer:

  • Дорожка 1 — нанесена на гель, до электрофореза.
  • Дорожка 2 — разделена, после электрофореза.

Дорожки:

  • M — Маркер длин ДНК GeneRuler 1 kb Plus.
  • C — необработанная плазмидная ДНК.
  • 1 — гидролиз плазмидной ДНК в течении 5 мин. FastDigest XhoI.
  • 2 — гидролиз плазмидной ДНК в течении 5 мин. FastDigest ApaI.
  • 3 — двойной гидролиз плазмидной ДНК в течении 5 мин. FastDigest XhoI and FastDigest ApaI.
  • 4 — гидролиз плазмидной ДНК в течении 1 часа ApaI.
  • 5 — гидролиз плазмидной ДНК в течении 1 часа XhoI.
  • 6 — двойной гидролиз плазмидной ДНК в 1-кратном буфере Tango с 4-кратным избытком ApaI в течение 1 часа, и затем в 2-кратном буфере Tango с XhoI в течение еще 1 часа.

  • Дорожка М — маркер длины GeneRuler Express, Thermo FS.
  • Дорожка 1 — контрольный материал, нерасщепленная плазмидная ДНК.
  • Дорожка 2— FastDigest EcoRI.
  • Дорожка 3 — FastDigest EcoRI и FastDigest KpnI.
  • Дорожка 4 — FastDigest EcoRI, FastDigest KpnI и FastDigest SmaI.


Информация для заказа:

Пока нет данных. Перейти в каталог
B64
5х1 мл
хранение -30...-5°C
21 541, руб.
1 770 CNY
105 896,= AMD

Универсальный буфер FastDigest является уникальным буферным раствором для гидролиза, который обеспечивает 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции для ускоренного гидролиза ДНК FastDigest.

Буфер позволяет выполнять двукратный и многократный гидролиз ДНК с любой комбинацией ферментов. Нет необходимости в последовательном гидролизе разными эндонуклеазами рестрикции или смене буфера.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как лигазы, фосфотазы, киназы и мезофильные ДНК-полимеразы также имеют 100% активность в буфере FastDigest. Таким образом, ферменты, используемые в последующих применениях, могут быть непосредственно добавлены в реакционную смесь.

Преимущества универсального буфера FastDigest:

  • обеспечивает быстрое однократное, двойное или многократное расщепление ДНК в течение 5-15 минут;
  • 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest;
  • 100% активность ДНК/РНК модифицирующих ферментов;
  • нет необходимости в промежуточных стадиях очистки ДНК;
  • исключает стадии последовательного гидролиза и замену буфера.


Концентрация

10x

Примечание

Хранение при 4 °C не более 6 месяцев.

Условия хранения

-20°С

Примечание: список всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021 г.».

Таблица «Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS»

Ферментативная активность эндонуклеаз рестрикции Thermo FS
  • Буфер FastDigest для ускоренного гидролиза ДНК эндонуклеазами рестрикции FastDigest, 10x
B72
5х1 мл
По запросу
По запросу
По запросу
Универсальный буфер FastDigest Green является уникальным буферным раствором для гидролиза, который обеспечивает 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции для ускоренного гидролиза ДНК FastDigest.

Буфер позволяет выполнять двукратный и многократный гидролиз ДНК с любой комбинацией ферментов. Нет необходимости в последовательном гидролизе разными эндонуклеазами рестрикции или смене буфера.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как лигазы, фосфотазы, киназы и мезофильные ДНК-полимеразы также имеют 100% активность в буфере FastDigest Green. Таким образом, ферменты, используемые в последующих применениях, могут быть непосредственно добавлены в реакционную смесь.

FastDigest Green содержит утяжеляющий раствор и трекинговые красители для прямого нанесения реакционной смеси на гель.

Для применений, требующих анализа продукта с помощью флуоресцентного возбуждения (например, измерения концентрации в УФ-свете), рекомендуется бесцветный FastDigest буфер.

Преимущества универсального буфера FastDigest Green

  • Обеспечивает быстрое однократное, двойное или многократное расщепление ДНК в течение 5-15 минут;
  • 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest;
  • 100% активность ДНК/РНК модифицирующих ферментов;
  • нет необходимости в промежуточных стадиях очистки ДНК;
  • исключает стадии последовательного гидролиза и замену буфера;
  • прямое нанесение реакционной смеси на гель.

Концентрация

10x

Примечание

Хранение при 4 °C не более 6 месяцев.

Условия хранения

-20 °С

Таблица «Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS»

Ферментативная активность эндонуклеаз рестрикции Thermo FS
  • Буфер FastDigest Green для ускоренного гидролиза ДНК эндонуклеазами рестриции FastDigest, с буфером для нанесения, 10x

См. также:


Ниже вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме

Раскрыть анкету для отправки запроса

Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!