Видео. Обучающее видео по настройке Attune CytPix, Thermo FS, англ., 2021 г.

Проточный цитометр Attune CytPix для широкого спектра задач – компактный, простой, удобный в использовании.

С помощью изображений полученных Attune CytPix можно оценит морфологию клеток, отслеживать контаминацию, показать межклеточные взаимодействия, морфологические характеристики апоптотических клеток и убедиться, что через луч лазера проходит отдельная клетка, а не конгломераты, их обломки или мусор, а так же можно просматривать и группировать изображения.

Уникальные особенности проточного цитометра Attune CytPix

• Возможность протокола анализа без лизиса и отмывок для минимизации потери клеток, и экономии время, а также упрощение подготовки;
• снижение времени пробоподготовки на 65%;
• характеристика клеточных популяций;
• стабильное качество изображения при высокой скорости потока;
• описание морфологии апоптотических клеток;
• исследование межклеточных взаимодействий;
• контроль качества клеточных культур, отслеживание контаминации;
• просмотр и группировка изображений, а также определение типов клеток;
• визуализация для подтверждения и настройки гейта, включая только отдельные клетки, представляющие интерес;
• система очистки, которая механически уменьшает возникновение засорения.

Протоколы подготовки образцов.

Примеры использования проточного цитометр Attune CytPix

Рисунок 1. Ядра эритроцитов курицы (CEN) склонны слипаться в дублеты или другие агрегаты. Стратегия гейтирования слипшихся ядер эритроцитов курицы с Attune CytPix.

Рисунок 2. С помощью проточного цитометра Attune CytPix можно просматривать и группировать изображения, а также определять типы клеток E. coli на основе их морфологических характеристик. В течении роста клетки E. coli, развиваются в два типа колониеобразующих клеток - короткие, которые напоминают отдельные клетки, и удлиненные структуры.

Рисунок 3. Отслеживание контаминации критически важно для анализа клеточных линий. На пример, перед трансплантацией клеток Вы можете их проверить на контаминацию с помощью Attune CytPix.

Рисунок 4. Визуализация Attune CytPix показывает межклеточные взаимодействия на примере CAR T-клеток, нацеленных на клетки лимфомы.

Рисунок 5. Анализ апоптоза клеток (с использованием аннексина V и PI) дополняется изображениями с выявленным морфологическим особенностями каждой клетки. Морфологические характеристики апоптотических клеточных популяции, полученные проточным цитометром Attune CytPix.

Особые преимущества проточного цитометра с визуализацией Attune CytPix

• Программное обеспечение и камера проточного цитометра Attune CytPix гарантируют, что события, которые анализируются, являются отдельными клетками, а не дублетами, скоплениями, обломками клеток или мусором.
• Акустическая фокусировка в 10 раз быстрее любой другой в проточном цитометре Attune CytPix.

Гидродинамическая фокусировка обеспечивает точное позиционирование клеток по центральной оси, позволяя клеткам быть сосредоточенными на точку лазерного луча и совместно с высокоскоростной камерой обеспечивает качественную картинку (Рисунок 6).

Проточный цитометр Attune CytPix с высокоскоростной камерой имеет большое значение для исследования в области клеточной биологии, генной терапии и оптимизации их протоколов.

Рисунок 6. Акустическая фокусировка в сравнении с традиционной гидродинамической фокусировкой.

Рисунок 7. Стабильное качество изображения при высокой скорости потока 12,5 мик/мин, 25 мик/мин, 100 мик/мин, 200 мик/мин, 500 мик/мин и 1000 мик/мин. Нет изменений в частоте визуализации и получению картин. Простая настройка фокуса и камеры для получения качественного изображения.

Технические характеристики проточного цитометра Attune CytPix

• Количество лазеров – 2/4;
• каналы детекции – канал прямого и бокового светорассеяния и 14 флуоресцентных каналов;
• освещение изображения – 405 нм лазер с менее 50 наносекундный импульс;
• акустическая фокусировка;
• чувствительность – ≤80 MESF for FITC, ≤30 MESF for PE, ≤70 MESF for APC;
• скорость анализа, событий/сек – более 35 тыс.;
• скорость фотографии, фото/сек – 6000;
• кратность увеличения – 20×;
• разрешение камеры, нм/Мп – 0,3;
• размер частиц, нм – до 800;
• статус использования – только для исследований;
• программное обеспечение – Invitrogen Attune 21 CFR Part 11;
• процессор – Nvidia Quadro P2200 GPU;
• жесткий диск – 2 x 8TB SSD, 2,5-inch Samsung 870 QVO, 560 MB/s;
• габариты, В × Ш × Г, см – 49 × 58 × 43.

Опции: автоподатчик Invitrogen CytKick Autosampler и робот подачи планшетов Orbitor RS2 Microplate Mover увеличат операционную мощность, уменьшат количество ошибок, связанных с человеческим фактором.

Рисунок 8. Дополнительные конфигурации увеличивают операционную мощность, уменьшают количество ошибок, связанных с человеческим фактором.
(A) Attune CytPix Flow Cytometer
(B) Invitrogen CytKick Autosampler
(C) Orbitor RS2 Microplate Mover

Таблица 1. Сравнение автосэмплеров Invitrogen CytKick и CytKick Max

Характеристика	Автосэмплер CytKick	Автосэмплер CytKick Max
Пропускная способность	42 мин для 96-луночного планшета в высокопропускном режиме	22 мин для 96-луночного планшета (в ускоренном режиме с одной промывкой, одного смешивания и полного анализа образца 20 мкл)
Совместимость	96-луночные глубоколуночные планшеты 96-луночные стандартные планшеты 384-луночные глубоколуночные планшеты 384-луночные стандартные планшеты	96-луночные глубоколуночные планшеты 96-луночные стандартные планшеты 384-луночные глубоколуночные планшеты 384-луночные стандартные планшеты 1,5 и 2 мл микроцентрифужные пробирки в шативе (до 24 мест) 96-луночные планшеты, запечатанные фольгой 384-луночные планшеты, запечатанные фольгой, дополнительные типы планшет

Таблица 2. Конфигурации цитометра Attune CytPix.

* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.

Таблица 3. Конфигурация лазеров, количество каналов детекции в сравнении Attune CytPix с Attune NxT

* - Число каналов детекции включает все каналы флюоресценции, а также каналы прямого и бокового рассеяния.

Выбрать можно конфигурацию прибора, соответствующую вашим потребности. Проточный цитометр Attune CytPix доступен в конфигурациях с 2–4 лазерами с визуализацией в светлом поле, а проточный цитометр Attun NxT доступен с 1–4 лазерами без визуализации.

Таблица 4. Выбор красителей для определения жизнеспособности клеток