Среды для заключения препаратов

Среда для заливки и замораживания OCT (Optimal Cutting Temperature Compound) — это специализированная водорастворимая матрица, используемая для подготовки высококачественных замороженных гистологических срезов. OCT надёжно обволакивает биоптат, обеспечивая механическую поддержку, улучшая целостность структуры и позволяя получать тонкие, равномерные срезы без деформаций.

Характеристики среды

• Объём, мл — 110;
• состав — водорастворимая смесь полиэтиленгликоля и поливинилового спирта;
• назначение — матрица для замораживания и срезания тканей;
• условия хранения — при комнатной температуре;
• срок годности — 24 месяца;
• совместимость — подходит для последующих гистохимических и иммуногистохимических окрасок.

В отличие от парафина или других несмываемых сред, OCT не требует сложной депарафинизации и совместим с широким спектром методов анализа, включая флуоресцентную микроскопию и экспрессию антигенов. Для получения оптимальных результатов рекомендуется предварительно выдержать ткань при -20 °C перед заморозкой в OCT, а фиксированные образцы — провести через градиент сахарозы для предотвращения образования кристаллов льда.

После срезания и переноса препарата на предметное стекло избыток OCT легко удаляется промывкой в воде или буфере, поскольку состав полностью водорастворим. Это исключает остаточное фоновое окрашивание при последующих гистологических или иммуногистохимических реакциях, что особенно важно для чувствительных методов детекции.

Монтирующая среда используется для заключения гистологических препаратов между покровным и предметным стеклами. Препятствует высыханию препарата, сохраняя его первоначальную структуру в течение длительного времени (много лет), а также уменьшает скорость затухания флуоресценции флуоресцентных красителей, если такие используются при окрашивании гистологического препарата.

Состав набора: раствор, готовый к применению, во флаконе.

Фасовка: 10 мл, 25 мл.

Срок годности: 12 месяцев.

LumiMount — это готовая к использованию монтирующая среда на водной основе, предназначенная для надёжной герметизации флуоресцентно меченых клеточных и тканевых препаратов перед микроскопией. Среда содержит специальные компоненты, замедляющие фотобелинг флуорохромов, что позволяет сохранять яркость сигнала в течение всего сеанса визуализации и при повторных просмотрах.

Среда обеспечивает стабильные результаты за счёт стандартизированной формулы. После нанесения под покровное стекло среда постепенно концентрируется за счёт испарения воды, и её коэффициент преломления возрастает до 1,46 — значения, близкого к оптическим характеристикам стекла. Это улучшает качество изображения и повышает разрешающую способность при флуоресцентной микроскопии.

Характеристики среды

• Объём, мл — 15;
• основа — водная;
• коэффициент преломления (жидкая фаза) — 1,38;
• коэффициент преломления (после частичного высыхания) — до 1,46;
• тип герметизации — полупостоянная;
• условия хранения препарата после монтирования, °С — от +2 до +8;
• совместимость — совместима с большинством стандартных флуорохромов (FITC, TRITC, Cy3, Alexa Fluor и др.);
• дополнительно — рекомендуется герметизация краёв покровного стекла лаком.

Герметизация, обеспечиваемая средой, является полупостоянной: препараты могут храниться при +2…+8 °С в темноте в течение нескольких недель без значительной потери сигнала. При необходимости повторного анализа покровное стекло легко удаляется — достаточно поместить слайд в PBS-буфер до полного растворения среды. Для максимальной долговечности рекомендуется дополнительно обработать края покровного стекла водонепроницаемым лаком, что предотвратит высыхание и проникновение влаги извне.

Благодаря широкой совместимости с основными флуоресцентными метками среда подходит для одно- и многоцветной микроскопии и станет надёжным решением как в исследовательских, так и в диагностических лабораториях.

LumiMount DAPI — это готовая к использованию фиксирующая среда на водной основе, содержащая ядерный краситель DAPI (4’,6-диамидино-2-фенилиндол). Она предназначена для одновременного окрашивания клеточных ядер и герметизации флуоресцентно меченых цитологических или гистологических препаратов. DAPI избирательно связывается с AT-богатыми участками двухцепочечной ДНК, вызывая более чем 20-кратное усиление синей флуоресценции. Максимумы спектра: поглощение — 358 нм, эмиссия — 461 нм.

Характеристики среды

• Объём, мл — 15;
• основа — водная;
• содержит DAPI — да;
• коэффициент преломления (жидкая фаза) — 1,38;
• коэффициент преломления (после частичного высыхания) — до 1,46;
• тип герметизации — полупостоянная;
• условия хранения препарата после монтирования, °С — от +2 до +8;
• совместимость — совместима с большинством стандартных флуорохромов;
• дополнительно — рекомендуется герметизация краёв покровного стекла лаком.

В традиционных протоколах окрашивание ядер и монтирование выполняются раздельно, что увеличивает время подготовки образца и риск повреждения сигнала. Кроме того, без специальных стабилизирующих добавок флуорохромы быстро теряют яркость под микроскопом. Данная среда решает обе задачи за один шаг: обеспечивает чёткую визуализацию ядер и защищает весь флуоресцентный сигнал от фотобелинга благодаря встроенным антифейд-компонентам.

После нанесения среда постепенно концентрируется под покровным стеклом за счёт испарения воды, что приводит к увеличению коэффициента преломления до 1,46 — значения, близкого к оптическим характеристикам стекла. Это улучшает качество изображения при микроскопии. Герметизация считается полупостоянной: препараты можно хранить при +2…+8 °С в темноте в течение нескольких недель. При необходимости покровное стекло легко удаляется путём инкубации слайда в PBS-буфере до полного растворения среды.

Для максимальной долговечности образца рекомендуется дополнительно герметизировать края покровного стекла водонепроницаемым лаком — это предотвратит высыхание и проникновение влаги. Среда совместима с большинством распространённых флуоресцентных меток (FITC, TRITC, Cy3, Alexa Fluor и др.), что делает её универсальным решением для многоцветной микроскопии.

LumiMount Plus — это готовая к применению монтажная среда на водной основе, предназначенная для фиксации и последующей микроскопии флуоресцентно меченых клеточных и тканевых образцов. Благодаря повышенной вязкости состав легко наносится пипеткой, равномерно распределяется под покровным стеклом и минимизирует образование воздушных пузырей, что особенно важно при подготовке высококачественных микропрепаратов.

Основное преимущество данной среды — это способность эффективно подавлять фотобелинг флуорохромов и флуоресцентных белков, что значительно увеличивает временной интервал для проведения микроскопии и документирования результатов. После нанесения среда постепенно теряет влагу, затвердевает и формирует прозрачную матрицу с коэффициентом преломления 1,52, близким к стеклу, что улучшает оптическое разрешение при наблюдении.

Характеристики среды

• Объём, мл — 15;
• основа — водная;
• консистенция — вязкая;
• коэффициент преломления (до высыхания) — 1,43;
• коэффициент преломления (после полимеризации) — 1,52;
• тип герметизации — полупостоянная;
• условия хранения препарата после монтирования, °С — от +2 до +8;
• совместимость — не рекомендуется для использования с интеркалирующими ядерными красителями (DAPI, Hoechst и аналогами).

Препараты могут храниться в течение нескольких недель или месяцев при температуре от +2 до +8 °С в темноте. При необходимости покровное стекло можно аккуратно снять — для этого достаточно погрузить слайд в буферный раствор (например, PBS) до полного растворения среды.

Важно отметить, что состав LumiMount Plus не совместим с ДНК-интеркалирующими красителями, такими как DAPI и Hoechst, поскольку может нарушать их связывание с ядерной ДНК или снижать интенсивность флуоресценции. Поэтому для ядерного окрашивания рекомендуется использовать альтернативные монтажные среды, специально разработанные для работы с этими красителями.